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El material presentado se refiere a la clonación del promotor y la identificación in silico de elementos cis-activos localizados en el gen de la copalil difosfato sintasa (CPS) de Salvia miltiorrhiza. La planta es interesante desde el punto de vista médico debido a su importante actividad biológica, dependiente de compuestos terpenoides conocidos como tanshinonas. Dado que las vías metabólicas de la biosíntesis de las tanshinonas no se conocen en su totalidad, decidimos descifrar el aspecto desconocido de la regulación transcripcional de la CPS, enzima de crucial importancia para la biosíntesis de las tanshinonas. Identificamos numerosos motivos cis-activos, junto con factores trans homólogos potencialmente activos en la regulación del gen CPS de S. miltiorrhiza. El análisis de los genes de los factores trans coexpresados con CPS de A. thaliana y su comparación con los factores trans identificados mediante búsquedas in silico del promotor CPS de S. miltiorrhiza no reveló ninguna proteína común. Para validar experimentalmente los resultados de las búsquedas in silico, se evaluó la influencia de la auxina, la giberelina, el ácido salicílico y la alta concentración de sal en la actividad del promotor: se midió la expresión del gen gus 0, 12, 24, 48, 72 y 96 horas después del tratamiento hormonal, o durante una exposición de 96 horas a 100 mM de NaCl.
Info autore
Dr Piotr Szymczyk, kierownik Katedry Biotechnologii Farmaceutycznej Wydziäu Farmacji Uniwersytetu Medycznego w ¿odzi (Polska). Stopie¿ doktora nadany przez Uniwersytet ¿ódzki.
