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Mit diesem praxisorientierte Leitfaden der RNA-Interferenz kann sich jedes Labor, das über geeignete Ausrüstung zum Handling von Nukleinsäuren verfügt, an Aufgaben der Inaktivierung von Genen wagen! Schritt für Schritt wird die Funktionsweise der RNAi in Nematoden, Insekten und Säugetieren, die Durchführung entsprechender Versuche in Zellkulturen und die Auswertung der Ergebnisse diskutiert. Interessant sind die Ausblicke auf Einsatzmöglichkeiten der Methoden in der Gentherapie. - Die Autorin hat alle Versuchsvorschriften im eigenen Labor getestet. Sie gibt viele nützliche Hinweise zur Optimierung der Experimente und zur Fehlersuche.
List of contents
Introduction- Mechanism of RNAi- RNAi as a Tool for Functional GenomicsRNAi in C.elegans- Practical Application- Target Evaluation- Synthesis and Delivery of dsRNA- Genome-wide ScreeningRNAi in Drosophila- Practical Application- Synthesis and Delivery of dsRNA- RNAi in Cell LinesRNAi in mammals- Transient RNAi in Cell Culture- Design and Synthesis of siRNAs- Delivery of siRNAs into Cells- Analysis and Validation of siRNAs- RNAi with Hairpin RNAs- Inducible RNAi- RNAi in mice- Screening MethodsRNAi Resources- Web Resources- List of Suppliers- Glossary of Terms
About the author
Ute Schepers studied Chemistry at the Kekulé-Institut für Organische Chemie und Biochemie, University of Bonn (Germany), where she completed her PhD thesis in the laboratory of Prof. Dr. K. Sandhoff in 1997. She then moved to Boston for a post-doctoral fellowship in the laboratory of Tomas Kirchhausen at the Department of Cell Biology, Harvard Medical School. Since her return to Bonn in 2000 she is pursuing her own research projects using a combination of chemical and genetic methods for the further development of RNA interference in mammals. One of her main efforts is the chemical synthesis of novel molecular transporters for therapeutical RNAi application.
Summary
Mit diesem praxisorientierte Leitfaden der RNA-Interferenz kann sich jedes Labor, das über geeignete Ausrüstung zum Handling von Nukleinsäuren verfügt, an Aufgaben der Inaktivierung von Genen wagen! Schritt für Schritt wird die Funktionsweise der RNAi in Nematoden, Insekten und Säugetieren, die Durchführung entsprechender Versuche in Zellkulturen und die Auswertung der Ergebnisse diskutiert. Interessant sind die Ausblicke auf Einsatzmöglichkeiten der Methoden in der Gentherapie. - Die Autorin hat alle Versuchsvorschriften im eigenen Labor getestet. Sie gibt viele nützliche Hinweise zur Optimierung der Experimente und zur Fehlersuche.
Report
"Mit diesem Buch stellt die Autorin eine deutliche, gut durchdachte und auf die Praxis ausgerichtete Orientierungshilfe zur Verfügung... Ich wünsche dem Buch, dass es ein schneller Wegbereiter zu erfolgreichen Experimenten wird, ähnlich wie die Verbreitung des Protokolls am Anfang der RNAi in C. elegans einen Schub für neue Erkenntnisse brachte."Nachrichten aus der Chemie"Ein Schwerpunkt des Buches sind die zahlreichen Laborprotokolle zu den verschiedenen Anwendungen der RNAi in den unterschiedlichen Modellsystemen. Diese Verbindung zwischen Experiment und biologischem Hintergrund macht das Buch attraktiv für Labors, die sich in die RNAi-Techniken einarbeiten wollen."Pipette"Insgesamt ist dieses Buch für alle, die sich mit RNA-Interferenz befassen, unbedingt zu empfehlen."biologen heute
