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T. b. brucei alpha und beta tubulin Gene wurden in E. coli unter Verwendung des pTrP2 Expressionsplasmids und 3-beta-Indoleacrylsäure als Induktor exprimiert. Die exprimierten Tubuline wurden durch SDS-PAGE analysiert und durch Western Blot bestätigt, wobei sie eine identische scheinbare Molekülmasse von 50 kDa hatten. Die exprimierten Tubuline wurden einzeln in 8 M Harnstoff gelöst und 20-fach verdünnt, wonach sie konzentriert und ausgiebig gegen MES-Puffer dialysiert wurden. Nach der Dialyse betrug die durchschnittliche Ausbeute für Alpha- und Beta-Tubulin 0,7 g pro Liter Kultur. Polyklonale Antikörper wurden in jedem der 56 Kaninchen hergestellt, die mit drei Dosen der konzentrierten Tubuline entweder bei 150 & mgr; g oder 450 & mgr; g pro Immunisierung pro Tier immunisiert waren. Die Wirkung dieser Antikörper auf T. b. Das Wachstum von Brucei wurde durch Kultivieren von T. b. Brucei-Blutkreislauf bilden sich in bis zu 25% der von Kaninchen gezüchteten Antiseren. Die Antiseren der anderen Kaninchen hemmten T. b nicht. Brucei Wachstum in der Kultur. Diese Ergebnisse zeigen, dass Antikörper gegen bakteriell exprimiertes Trypanosomentubulin für T. b möglicherweise nicht zytotoxisch sind. Brucei.
About the author
David Kateete (Doktorand, Makerere University, Kampala, Uganda) befindet sich derzeit in seinem letzten Ausbildungsjahr. Er interessiert sich für Pathogenbiologie und studiert derzeit Zell-Zell-Signalübertragung in Bakterien. Er ist außerdem Dozent in der Abteilung für Medizinische Mikrobiologie am Makerere University College of Health Sciences.
